1． 从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。

2． 迅速放入盛有 36 ℃～ 37 ℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。

3． 剪开纱布口袋，取出安剖，用 70 ％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加 10ml 培养液，吹打使细胞悬浮。

4． 低速离心（ 500 ～ 1000 转 / 分） 5 分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。

5． 加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。