我养细胞1个月了，经历了失望-绝望-希望的过程，现在把学到的几点注意问题跟大家分享一下，希望能够对新手们稍有帮助，也欢迎高手指教：

1. 细胞不要过度消化，有些贴壁不牢的如293T，加入胰酶在台子里晃晃就可以了，不用放到温箱中；

2. 传代时，细胞分的稀了或者分的不均匀，形成单细胞的克隆群，细胞就会长成密密麻麻的一群，如293T会成为小方块状，而不是正常的不规则形状，这时候，即使没有长满盘，也应该消化重新铺板。

3. 贴壁细胞的上清看起来清亮、颜色正常时，即使在镜下检测有些悬浮物，一般不是污染而是死细胞，尤其是复苏的细胞，由于有死细胞，会有很多悬浮物。（我以前看到有悬浮物就以为污染了，还倒掉了好不容易借来复苏的一盘细胞，后悔中）。污染了会看到明显的悬浊液。

4. 不能让培养基变色，稍微变黄就应该传代，如果没有长满，可以换液，但是如果变黄了，细胞就会皱缩，或者死亡，大批量的浮起来。这时候就别挽救了。

5. 关于污染，刚开始做的时候，无论怎么小心，还是会莫名其妙的污染。师姐说是人生必经阶段。现在我也很赞同这个理论。所以，绝望后别放弃才会有希望！

祝新手同志们都能顺利的迈出养细胞的第一步！