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免疫金银染色(IGSS)操作流程

关键词: 免疫金银染色 IGSS 操作流程来源: 互联网

(一)石蜡切片IGSS

(1)切片脱蜡至水。

(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。

(3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.

(4)l%EA(卵蛋白)15min,不洗。

(5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h.

(6)0.05m01/L(pH7.4)TBS洗3×5min.

(7)0.02m01/L(pH7.4)TBS(内含0.1%BSA)洗10min.

(8)1%EA 15min,不洗,1:10~1:20稀释的PAGlonm室温孵育1h,或37℃孵育30min.

(9)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗10min.

(10)1%戊二醛洗10min.

(11)双蒸水洗5min.

(12)1%明胶洗5min.

(13)银避光显影8~15min.

(14)双蒸水洗15min.

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