基因的图位克隆
关键词: 基因 图位 克隆来源: 互联网
图位克隆(Map-basedcloning)又称定位克隆(positionalcloning),1986年首先由剑桥大学的Alancoulson提出,用该方法分离基因是根据目的基因在染色体上的位置进行的,无需预先知道基因的DNA顺序,也无需预先知道其表达产物的有关信息,但应有以下两方面的基本情况:一是有一个根据目的基因的有无建立起来的遗传分离群体,如F、DH、BC、RI等。二是开展以下几项工作:1)首先找到与目标基因紧密连锁的分子标记;2)用遗传作图和物理作图将目标基因定位在染色体的特定位置;3)构建含有大插入片段的基因组文库(BAC库或YAC);4)以与目标基因连锁的分子标记为探针筛选基因组文库;5)用获得阳性克隆构建目的基因区域的跨叠群;6)通过染色体步行、登陆或跳跃获得含有目标基因的大片段克隆;7)通过亚克隆获得含有目的基因的小片段克隆;8)通过遗传转化和功能互补验证最终确定目标基因的碱基序列。
推荐方法
- Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) on Unfixed Chromatin from Cells and Tissues to Analyze Histone Modifications
- 大鼠雌激素(E)酶联免疫分析(ELISA)
- 常用基因诊断技术
- Array CGH of Microdissected Fresh or Formalin Fixed DNA
- 多基因病
- AFLP: not only for fingerprinting, but for positional cloning
- 毒物反应的遗传基础
- 医学遗传学在现代医学中的地位
- Nucleosome mobilization assay
- Preparing Vector DNA For Transfection/Targeting