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免疫中和反应技术(Neutralization test technique):固定血清稀释病毒法

关键词: 免疫中和 反应技术 固定血清 稀释病毒法来源: 互联网

病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力,谓之中和试验。本试验主要用于: ① 从待检血清中检出抗体,或从病料中检出病毒,从而诊断病毒性传染病; ② 用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型; ③ 测定抗病毒血清或抗毒素效价; ④ 新分离病毒的鉴定和分型,中和试验不仅可在易感的实验动物体内进行,亦可在细胞培养上或鸡胚上进行。试验方法主要有简单定性试验、固定血清稀释病毒法、固定病毒稀释血清法、空斑减少法等。

本法多将病毒作 10 倍递增稀释,分置 2 列试管,第一列加正常血清(对照组),第二列加待检血清(试验组)。混合后,置 37 ℃ 作用 1h ,将各管混合液分别接种选定的试验动物,每一稀释度用 3 ~ 5 只动物。接种后,逐日观察,并记录其死亡数,观察结束后,计算 LD50 和中和指数,本法适用于大量检样的检测。

表 固定血清稀释病毒法术式

 

混合前

 

病毒稀释

 

2 × 10-1

 

 

2 × 10-2

 

 

2 × 10-3

 

 

2 × 10-4

 

 

2 × 10-5

 

 

2 × 10-6

 

 

2 × 10-7

 

 

-

 

正常

 

血清

 

稀释病毒

 

-

 

-

 

-

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

-

 

正常血清

 

-

 

-

 

-

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

对照组

 

稀释液

 

-

 

-

 

-

 

-

 

-

 

-

 

-

 

1.0

 

 

待检血清

 

稀释病毒

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

-

 

待检血清

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

1.0

 

 

中和组

 

稀释液

 

-

 

-

 

-

 

-

 

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