[实验目的]

　　以血液凝固时间作为指标，了解对血液凝固影响的因素，加深对生理止血过程的理解。

[实验原理]

　　血液凝固是一个酶的有限水解激活过程，在此过程中有多种凝血因子参与。根据凝血过程起动时激活因子来源不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中，外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。

[实验对象]

　　家免。

[实验药品]

　　25%氨基甲酸乙酯溶液，肝素（8 U/ml）、2%草酸钾溶液、生理盐水，液状石蜡、肺组织浸液（取兔肺剪碎，洗净血液，浸泡于3～4倍量的生理盐水中过夜，过滤收集的滤液即成肺组织浸液，存冰箱中备用）。

[ 仪器 器械]

　　免手术台，常规手术器械，动脉夹，动脉插管(或细塑料导管)，注射器， 试管 8支，小烧杯2个， 试管 架,竹签1束(或细试管刷),秒表。

[实验方法与步骤]

　　1.静脉注射氨基甲酸乙酯溶液，按5 ml/kg的量，将兔麻醉，仰卧固定于兔手台上。正中切开颈部，分离一侧颈总动脉，远心端用线结扎阻断血流，近心端夹上动脉夹。在动脉当中斜向剪一小切口，插入动脉插管(或细塑料导管)，结扎导管以备取血。

　　2.试管准备好。
　　试管1 不加任何处理（对照管）
　　试管2 用液状石蜡润滑整个试管内表面
　　试管3 放少许棉花
　　试管4 置于有冰块的小 烧杯 中
　　试管5 加肝素8U
　　试管6 加草酸钾1～2 ml
　　试管7 加肺组织浸液0.1 ml

　　3.放开动脉夹，每管加入血液2 ml。将多余的血盛于小 烧杯 中，并不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成。

　　4.记录凝血时间 每个 试管 加血2 ml后，即刻开始计时，每隔壁15 s 倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状不再流动为止，记录所经历的时间。5、6、7号 试管 加入血液后，用拇指盖住试管口将试管颠倒两次，使血液与药物混合。

　　5.如果加肝素和草酸钾的试管不出现血凝,可再向两管内分别加入0.025 mol•L-1的CaCl溶容液2～3滴,观察血液是否发生凝固?

[注意事项]

　　1.采血的过程尽量要快，以减少计时的误差。对比实验的采血时间要紧接着进行。

　　2.判断凝血的标准要力求一致。一般以倾斜试管达45o时，试管内血液不见流动为准。

　　3.每支试管口径大小及采血量要相对一致，不可相差太大。

[实验结果]

　　将实验结果及各种条件下的凝血时间按表8.8填写,并进行比较、分析解释产生差异的原因.