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免疫刺激序列基因佐剂

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免疫刺激序列基因佐剂

免疫刺激序列(ISS)为非甲基化的短核苷酸(胞嘧啶和鸟嘌呤，CpG)为基序的寡脱氧核苷酸(ODN)短序列，其序列中的5’-嘌呤-嘌呤-CpG-嘧啶-嘧啶-3’对人和动物有强烈的免疫刺激作用，可以诱导以Thl为主的免疫应答，诱导产生Thl类细胞因子如IL-1、IL-6、IL-12、IL-18、TNF等，增加免疫相关细胞MHC-Ⅱ类分子、CD40、B7-2、ICAM、CMF等表达，增强炎性细胞因子的分泌，促进抗原呈递细胞的分化和成熟，增强疫苗原的免疫原性，还与氢氧化铝等佐剂有协调作用，是安全有效的佐剂。CpG序列常见于细菌的质粒或基因组 DNA中，脊椎动物中少见。免疫刺激序列的作用机制是通过与免疫细胞表明受体(TLR9)结合后被内吞，激活了NF-xB信号通路以及丝裂原激活蛋白激酶而直接激活免疫细胞，效应细胞包括单核细胞、巨噬细胞、B细胞、淋巴细胞、树突状细胞等，这些细胞通过分泌细胞因子、上调MHC-Ⅱ分子以及表达共刺激分子而间接激活抗原特异性T细胞和NK细胞。

目前发现佐剂效应最强的CpG序列是：AGCGCT、AACGTT和GACGTC。并非所有的CpG序列都具备免疫刺激作用，CpG序列的免疫刺激作用还受其长度、注射途径、用量、是否被甲基化以及基序的化学结构和类型的影响。实验证明，Ad2型腺病毒非甲基化CpG基序的免疫刺激功能较弱；通过加长CpG序列与HBsAg共同免疫小鼠可获得更强的保护性免疫应答；以基因枪注射CpO序列主要对Thl有刺激作用，而肌内注射以Th2刺激为主；如果过量使用CpG序列，可激活大量免疫细胞，导致剧烈炎症反应，甚至中毒性休克或死亡。实验还表明D类CpG序列主要刺激NK细胞，而K类CpG序列刺激B细胞。通过人工修饰和有目的的合成CpG序列，可以极大的改良CpO序列免疫刺激作用，提高特异性免疫应答效应，延长半衰期，使之更有效地进入抗原呈递细胞，促进免疫过程。目前，CpC,序列结合DNA疫苗已用于抗病毒(如乙型肝炎病毒)的临床试验，显示出良好的应用前景。

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