高效液相色谱仪化学键合固定相的使用注意事项：一、硅胶键合相的稳定性：1、键合相的使用寿命取决于键合的有机官能团在硅胶表面的覆盖程度。当覆盖量大或呈多分子覆盖层时，会增加稳定性。2、通常正相键合相的稳定性低于反相键合相。3、反相烷基键合相的稳定性与使用的流动相的 PH 值有关，通常水溶液的 PH=2～8。4、硅胶中的残留硅醇基会对色谱分离产生不良影响。二、键合相色谱分离的重现性：由于键合相制备时选用基体硅胶特性的差别和键合反应时官能团覆盖量的不同，会产生载体诱导选择性的变化。三、键合相色谱分离的选择性：在反相色谱中，使用同一种 ODS 固定相，并用两种极性相近但由不同溶剂组成的流动相时，会由于溶剂诱导选择性的变化，而获得不同的分析结果。四、疏水塌陷：键合相色谱柱在有机溶剂含量低甚至 100% 水流动相条件下，一旦流速停止，推动水溶液流动相进入硅胶孔隙的压力减小，疏水的微孔表面排斥极性流动相，会发生键合相孔隙脱水，从而导致所谓的疏水塌陷，对化合物的保留能力大大减弱。