高效液相色谱流动相是液体，对组分有亲合力，并参与固定相对组分的竞争，正确选择流动相溶剂直接影响样品组分的分离。一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。二、溶剂与检测器匹配：对于紫外吸收检测器，不能用对紫外光有吸收的溶剂。对于示差折光检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达到最高灵敏度。三、高纯度：由于高效液相色谱灵敏度高，对流动相溶剂的纯度要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳或产生假峰。四、化学稳定性好。五、粘度适中：若溶剂粘度高，会增高压力，不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、甲醇和乙腈等。粘度过低的溶剂不宜采用，如戊烷等，它们容易在色谱柱和检测器内形成气泡，影响分离。