1. 适用范围

本标准适用于BECKMAN 125型高效液相色谱仪的使用操作。

2. 目的与意义

规范BECKMAN 125型高效液相色谱仪的使用操作，保证高效液相测量结果的准确性。

3. 责任

质量分析人员全面负责本SOP的实施。

4. 仪器的组成

本系统由SYSTEM GOLD® 125溶剂输送泵、SYSTEM GOLD® 166检测器（190～360 nm）、Rheodyne 7725i手动进样阀、HT-330 柱温箱、BECKMAN色谱工作站、打印机等组成。

5. 操作步骤

5.1. 准备

5.1.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。

5.1.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向）。

5.1.3 配制样品和标准溶液，用合适的0.20μm滤膜过滤。

5.2. 开机

接通电源，依次开启泵、检测器开关，打开计算机进入win2000操作系统，双击桌面的32 Karat图标进入主菜单对话框，双击instrument图标进入色谱分析界面（包括Direct Control、Det166、Instrument Setup等界面）。

5.3. 创建分析方法

可在Direct Control界面直接点击各设备单元的图像进行流动相比例、流速、最大压力限、最小压力限、检测波长以及检测器开启与关闭等参数的设定，亦可点击“Methed/Instrument Setup” 进行相应的设定，然后点击“File/Methed/Save As”保存设定的方法。

5.4. 更换流动相并排气泡

将管路的吸滤器放入装有流动相的储液瓶中，逆时针转动排液阀90～180°，打开排液阀；设流速为5ml/min，冲洗3min后设流速为0停泵，将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。如管路中没有气泡，则排气泡操作可省略；如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。

5.5. 平衡系统

用流动相冲洗至基线漂移<0.001AU/min，噪声为<0.0005AU时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。

5.6. 输入样品信息

点击“Control/Single Run”，在Sanple ID（样品名称）、Method（方法）、Data path（保存路径）、Data file（文件名）输入相应的信息，然后点击Submit提交。

5.7. 进样

在“Direct Control”界面点击“AutoZero”键调零；用进样针定量吸取样品溶液，在进样阀处于“INJECT”状态下插入进样针；逆时针转动进样阀手柄，在“LOAD”状态下推针进样，再顺时针转动进样阀手柄使其回至INJECT状态即完成进样操作。