RT―PCR检测HeLa细胞中β3-actin的表达
关键词: rt pcr检测 hela 细胞来源: 互联网
1.0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)处理水 在1 L蒸馏水中加入1 mL DEPC,在磁力搅拌器上搅拌过夜,分装后高压灭菌30 rIlin备用。
2.5 X甲醛凝胶电泳缓冲液 0.1 mol/L MOPS 40 mmol/L NaAC 5 mmol/L EDTA(pH 8.0)
3.10 x RNA加样缓冲液 50%甘油 1 mmol/L EDTA(pH 8.0) 0.25%二甲苯青 0.25%溴酚蓝
4.6×DNA加样缓冲液 40%(质量/体积分数)蔗糖 0.25%二甲苯青 0.25%溴酚蓝
5.5 X第一链反应缓冲液 250 mmol/L Tris―HCl(pH 8.3) 375 mmol/L KCI 15 mmol/L MsCh
6.10×PCR缓冲液 200 rmnol/L riffs―HCI(pH 8.4) 500 mmol/L KCl
7.5×TBE(TIis一硼酸缓冲液) 称取54 g Tris碱,27.5 g硼酸,依次溶解于800 mL蒸馏水中,加入20 mL O.5 mol/LEDTA(pH 8.O)定容至1 L。
8.溴化乙啶(10 ms/mE) 在100 mL蒸馏水中,加人1 g溴化乙啶,在磁力搅拌器上搅拌数小时以确保其完全溶解,于室温避光保存。
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