指抗体的抗原结合簇同抗原的抗原决定簇的结合强度。通常以半抗原及其相对的抗体作试料，用平衡透析法进行检定。即以下式的结合常数 K为亲和力

　　[ ]表示克分子浓度（ mol／ 1）， Ab为抗体， H为半抗原， Ab— H表示抗体与半抗原的结合物。其值越大， Ab HAb— H的反应越向右侧进行，而亲和力就变强。实际上抗体是保有各种强度亲和力的抗体分子集团，故假如在平衡透析法方面求得抗体全部结合簇的一半处于与抗原结合状态的结合常数为 K0 ，就可把它作为那种抗体的平均亲和力。即使蛋白质和多糖类抗原，若分子较小（分子量在数万以内），亲和力的测定是可能的。将动物施行免疫后，逐日采血检验时，可以了解到随着抗体价的上升，其亲和力也升高（免疫成熟， immunological maturation）。