基因位于染色体上，而且位置相近的基因是相互连锁的，不难想象基因在染色体上是直线排列的，但如何来证明这个问题呢？

摩尔根的学生斯特蒂文特（ Sturtevant ）想出了一个巧妙的办法，那就是三点测交（ three － point test cross ）。从几何知识上知道，要证明 a 、 b 、 c 三点共线，可以通过三点之间的距离加以证明，当 ab bc=ac 时三点在一条直线上。斯特蒂文特借鉴了这一思路，选择了六个性连锁基因进行果蝇的杂交实验，为了很好地说明问题现在我们以红眼 V （ Vermilion eyes ）、翅无横脉 Cv （ crossveinless ）和截翅 Ct （ cut, or snipped wing edges ）三个基因为例，杂交及结果如下。

根据计算的结果，可以绘出 V 、 Cv 、 Ct 的遗传图。但是我们会发现 V － Ct （ 13.2 m.u ）和 Ct － Cv （ 6.5 m.u ）之和为 19.7 m.u ，大于 V － Cv 的距离（ 18.5 m.u ），这是什么缘故呢？这是因为 18.5 m.u 这个数据是 V － Cv 的重组值，即从 V 和 Cv 这两个标记的重组中直接得来的，这两点中如果发生双交换的话，因不会产生重组而无法计算，易被漏掉，但从 Cv － Ct 和 V － Cv 的重组中可以看到确实发生了两次双交换，交换率为 0.6 % × 2 ＝ 1.2% ，如果把漏掉的双交换值加进去则

（ V － Cv ）＝（ Cv － Ct ）＋（ V － Cv ）

18.5 m.u ＋ 1.2 m.u ＝ 6.5 m.u ＋ 13.2 m.u ＝ 19.7 m.u

因此我们可用下面的公式来表示 a － b 之间的重组值和双交换的关系：

ab ＝ ac ＋ cb － 2 （ ac ）（ cb ）

ab 是 a 和 b 两个基因之间的重组值。 c 是 a 与 b 之间的一个基因， ac 、 cb 表示 a 和 c 、 c 和 b 的重组值，（ ac ）（ cb ） 表示双交换值。

三点测交实验的意义在于

（1） 比两点测交方便、准确。一次三点测交相当于 3 次两点测交实验所获得的结果；

（2） 能获得双交换的资料；

（3） 证实了基因在染色体上是直线排列的。