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H33342释放法检测单核-巨噬细胞的胞毒作用
关键词： h33342 释放法 单核巨噬细胞来源： 互联网
实验试剂
H33342
实验设备
1. 微量荧光"W"测量板(德国Dynatech公司产品)
2. 用自动微量荧光分析仪(Micro-FluoDynatech)
实验材料
靶细胞(L929细胞株，对单核细胞的杀伤活性敏感)
实验步骤
1. 从单个核细胞中采用粘附法分离的单核细胞，经非特异性酯酶(ANAE)和台盼蓝染色，细胞纯度应>90％，细胞活力应>95％；
2. 收获靶细胞并将细胞浓度调至1×107 /ml；
3. 加入终浓度为10μmol/L的H33342，置37℃标记2h；
4. 用DMEM液离心洗涤3次，重悬浮于完全DMEM培养液中；
5. 将效应细胞和标记的靶细胞按一定比例(一般为20-50∶1)加入96孔圆底培养板200μl/孔，作3个复孔；置37℃5％CO2 温箱培养20h；
推荐方法
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