肿瘤的基因治疗   肿瘤的基因治疗原理     基因治疗(genetherapy)是应用理化方法或病毒介导的DNA转移技术，以功能正常的基因置换或增补缺陷基因，或将新的基因转移至靶细胞内使其安全、有效地发挥作用，达到治疗目的。基因转移主要有两种方式，一种是离体法(ex vivo)，即在体外将目的基因导入细胞内，再将修饰过的细胞回输患者体内，使外源性基因在体内表达；另一种是体内法(in vivo)，即将目的基因直接导入或通过病毒作为载体导人体内组织器官，使其进入靶细胞并充分表达，发挥作用。肿瘤基因治疗中常用的靶细胞有肿瘤细胞、TIL、纤维母细胞和骨髓干细胞等。而目的基因的导入，根据基因的作用机制分为四大类：     ①引入抑癌基因和抗体基因，阻止癌基因表达；     ②导人酶基因和耐药基因，提高抗肿瘤药物的疗效；     ③导人信号缺陷的血管上皮生长因子受体基因，抑制肿瘤旁血管生成；     ④导入某些细胞因子基因、膜表面分子和抗原识别基因等，增强肿瘤细胞的免疫原性，激发机体免疫功能，产生抗肿瘤免疫应答。 肿瘤基因治疗的四种主要途径 A.导入反义mRNA基因阻止癌基因mRNA的翻译；B.导入抗体基因阻止癌基因生长因子表达；C.导入前药转换酶增强抗癌药物的入免疫刺激因子基因，促进细胞因子表达和分泌。   肿瘤的基因治疗途径和机制     1．抑制癌基因表达     (1)向癌细胞导人反义ras或myc等基因，用反义核苷酸序列特异互补结合癌基因DNA和mRNA，阻止其转录、翻译和表达。    (2)向癌细胞导人抑癌基因如p53和RB等，利用其产物抑制癌基因表达，使丧失致癌性，诱导癌细胞凋亡。     (3)向癌细胞导入抗生长因子、抗癌基因产物的抗体编码基因，阻止相应的因子和蛋白在癌细胞膜上表达，抑制其恶性生长。     2．增强抗肿瘤药物的活性     (1)向肿瘤局部注射前药转换酶基因，如单纯性疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(HSV-tK)基因。HSV-tK能使非毒性核苷酸类似物ganeiclovir转变成毒性的三磷酸形式，从而杀伤癌细胞。HSV-tK基因只能整合至分裂相癌细胞的染色体，不整合至正常细胞，而哺乳动物细胞内源性tK酶对ganciclovir不敏感，因此该抗肿瘤作用具有有效性和安全性。     (2)向癌细胞导入药物敏感基因如CD基因，提高前药5FC的敏感性，增强杀瘤效果。     (3)将多药耐受基因如MDR-1等导人造血干细胞，使机体在抗肿瘤化疗中受到保护，从而提高患者对大剂量药物的耐药性，减少毒副作用和并发症。     3．抑制肿瘤局部血管生成  向肿瘤局部导人信号缺陷的VEGF受体基因，其产物仍能结合肿瘤细胞分泌的VEGF，但却阻止局部的血管形成，使肿瘤缺乏血供而生长受抑。     4．增强肿瘤细胞免疫原性，激发机体抗肿瘤免疫应答     (1)向癌细胞导人MHC I类、TAP和B7等基因，促进肿瘤抗原表达，增强肿瘤细胞的免疫原性，激活CTI。而杀伤靶细胞。     (2)向癌细胞或TIL导人细胞因子如IL-2、INF-~等基因，使细胞大量分泌细胞因子，激活肿瘤局部免疫活性细胞，促进T、B细胞的分化、增殖，提高机体抗肿瘤能力。