质粒提取过程参照E.Z.N.A Plasmid Extraction Kit进行。 （1） 用无菌牙签挑取平板上白色单菌落(5~10个)分别接种至3-5ml LB培养液(Amp )中,200rpm培养14~16小时； （2） 室温下，10,000g离心1分钟收菌； （3） 加入溶液I 250μl，涡旋重悬菌体； （4） 加入溶液II 250μl，温和倒转4~6次混匀，室温放置2分钟 （5） 加入350μl溶液III，温和倒转至有白色絮状沉淀产生， 室温下，10,000g离心10分钟； （6） 转移上清液于分离柱中，室温下，10,000g离心1分钟； （7） 倒弃流出液，加入500μl HB Buffer，室温下，10,000g离心1分钟 （8） 倒弃流出液，加入750μl Wash Buffer，室温下，10,000g离心1分钟，倒弃流出液，重复此步骤一次； （9） 室温下，10,000g离心1分钟，以去除分离柱中残余的乙醇 （10） 将分离柱重新放入一个干净的1.5ml离心管中，加入30~50μl灭菌水，静置3-5分钟，定温下，10,000g离心1分钟以洗出质粒DNA，-20℃保存。