差异性甲基化杂交(DMH) 1)微阵列构建 (1)基因组片段化:将雄性个体(雄性个体包括完整的染色体,即含有Y染色体)基因组DNA经MseI消化(MseI识别位点为TTAA,可以保证富含CpG的片段不被破坏)成约200bp的小片段,而CpG岛仍然保持相对完整。 (2)去除富含甲基化CpG的高度重复序列:如上所述,在正常组织或细胞中,5mC多发生在高度重复序列,使得这些重复序列得
来源:互联网 关键词:差异 甲基化 杂交 (DMH)
基因组非特异性甲基化水平的研究 1.3H―SAM掺入后液闪检测法 (1)将约2ug基因组与足量3H标记的SAM,甲基化酶(Sss工或HpaⅡ)共同温育,SAM的甲基化基团将被掺人到目的DNA中未甲基化的胞嘧啶上。 (2)以WhatmanDE81滤纸过滤此温育混合物,并以液闪缓冲液淋洗去掉未结合的3H标记的SAM,以液闪检测该滤纸上结合的’H标记的SAM量。如此值较高,则提示原来
来源:互联网 关键词:基因组 特异性 甲基化 水平 研究
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