1、色谱柱“堵”的表现

  “堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。

  2、色谱柱“堵”的原因分析

  原因1:配制流动相时细菌污染

  首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质,也能在液相流路系统最前端的过滤头上排除,真正容易引起问题的,是水中的细菌。解决它的方法很简单,就是确保水的可靠性。这里有两种方式推荐:

  (1)使用实验室专用纯水机,既方便又可靠,质量也放心。

  (2) 成箱购买市售品牌纯净水,先随机抽取一支做一下细菌平板实验,待菌落数合格方可使用。

  原因2:使用流动相时的细菌污染

  流动相刚开始没有长菌,在使用时却产生了细菌污染。这主要是在使用多元液相色谱仪时的一种不良使用习惯造成的。举最简单的例子:50%的甲醇水流动相,有两种使用方式。一种方式是在上机前就配好混合在一起,另一种方式是在流路A放纯甲醇,流路B放纯水。