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抗酸染色配置以及染色方法实验

2020.8.10

实验方法原理	抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。
实验步骤	碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂： 1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml 5％石炭酸溶液： 90ml 2. 脱色剂：浓盐酸：3ml 95％乙醇：97ml 3. 复染液（吕弗勒美兰液）：美兰乙醇饱和溶液： 30ml 10％氢氧化钾： 0.1ml 蒸馏水： 100ml 二、染色方法： l. 涂片经火焰固定，加石碳酸复红溶液，徐徐加热至有蒸汽出现，切不可沸腾。染5min，水洗。 2. 加脱色剂，不时摇动玻片至无红色脱落为止，水洗。 3. 加复染液，染0.5-Imin，水洗。 4. 干后镜检，分枝杆菌呈红色，背景为兰色。石炭团品红-硫酸美兰染色法染液：第一液：石碳酸品红溶液：取碱性品红乙醇饱和液10ml加5%石碳酸水溶液90ml混合。第二液：硫酸美兰液：美兰2g，溶于75ml水中，慢慢滴加浓硫酸25ml混合即成。方法：涂片经火焰固定后，滴加第一液微热染3min，水洗。再用第二液染约lmin，水洗。干后镜检。结果：抗酸菌呈红色，其他皆为兰色。

实验方法原理

抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。

实验步骤

碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）

一、实验试剂：

1. 萋纳石炭酸复红溶液：

碱性复红乙醇饱和溶液：10ml

5％石炭酸溶液：       90ml

2. 脱色剂：

浓盐酸：3ml 95％乙醇：97ml

3. 复染液（吕弗勒美兰液）：

美兰乙醇饱和溶液：    30ml

10％氢氧化钾：       0.1ml

蒸馏水：             100ml

二、染色方法：

l. 涂片经火焰固定，加石碳酸复红溶液，徐徐加热至有蒸汽出现，切不可沸腾。染5min，水洗。

2. 加脱色剂，不时摇动玻片至无红色脱落为止，水洗。

3. 加复染液，染0.5-Imin，水洗。

4. 干后镜检，分枝杆菌呈红色，背景为兰色。

石炭团品红-硫酸美兰染色法

染液：

第一液：石碳酸品红溶液：取碱性品红乙醇饱和液10ml加5%石碳酸水溶液90ml混合。

第二液：硫酸美兰液：美兰2g，溶于75ml水中，慢慢滴加浓硫酸25ml混合即成。

方法：涂片经火焰固定后，滴加第一液微热染3min，水洗。再用第二液染约lmin，水洗。干后镜检。

结果：抗酸菌呈红色，其他皆为兰色。

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