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革兰氏染色与细菌抗酸染色技术的操作技巧

2021.2.23

兰氏染色和抗酸染色都属于细菌形态学检查法,提到革兰氏染色大家肯定都非常熟悉,但是说到抗酸染色你不一定了解。今天我们进入细菌的花花世界,聊一聊细菌界的这两大染色法:

 

 

革兰氏染色(Gram stain)

 

用途:由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立,直到现今,革兰氏染色法仍是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。通过革兰氏染色,可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。

 

原理:细菌经龙胆紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的龙胆紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌(G+)由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此,能把复合物牢牢留在壁内,使其仍呈蓝紫色;而革兰氏阴性菌(G-)因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

 

染色结果:

 

革兰阳性菌(G+):蓝色

 

革兰阳性菌(G+):红色

 

其他组织:黄色

 

细胞核:红色

 

 

 

抗酸染色(Acid Fast Bacteria (AFB) Stain)

 

用途: 由埃利希(F.Ehrlich)1882年首创,并经F.齐尔(Ziehl)改进而创造出的细菌染色法,用于细菌标本涂片或菌落涂片的染色,目前常用于对分枝杆菌属进行初步鉴别。

 

原理: 分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质(主要成分为分枝菌酸),包围在肽聚糖的外面,具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌,脱色经复染呈蓝绿色的细菌为非抗酸性细菌。

 

染色结果:

 

抗酸菌组织:红色

 

其他细菌及背景:浅绿色

 

 


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