羊水细胞普通培养法和收获时间
羊水细胞普通培养法
1．一切操作均在严格无菌条件下进行，抽取羊水20～30ml，立即送往实验室。
2．将穿刺所得羊水离心（1500r/min）5分钟，而后在接种箱内吸出上清液留其他检查用，将剩下的0.5ml沉淀在管底的羊水细胞轻轻打匀，分别接种在两个盛有培养液的无菌培养瓶内，充分混匀，放入37℃5%CO2培养箱。
3．培养液有市售羊水培养液、张氏培养液或自制的F10培养液，L-谷氨酰胺，加小牛血清双抗，PH调至6.8,使用1周重新配制。
4．观察换液,培养5～7天，羊水内有活力的细胞就贴在瓶壁上，并开始生长，可在倒置显微镜下观察生长情况。如细胞已贴壁生长，以后每1～2天在倒置显微镜下观察一次。贴壁细胞的形态大多数为上皮样细胞，换液后成纤维细胞呈大片生长。
羊水细胞的收获时间
准确掌握羊水细胞收获时间是羊水细胞培养成功的关键。有以下标志即可收获：
1．培养瓶中有4～6个较大的细胞“克隆”；
2．细胞“克隆”中存在宛如明珠的分裂细胞，有时互相连接，成双成对，能在一个视野中计数10～15个球形细胞；标记一个视野的细胞数，弃去培养液加入秋水仙素和新鲜培养液继续培养。
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