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二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品制备——细胞

2019.3.28
实验材料

细胞

试剂、试剂盒

培养基

实验步骤

对体外悬浮培养生长的细胞或周期性细胞样品(如红细胞、淋巴细胞),理想的方法是通过离心收集,用磷酸盐缓冲液清洗并溶于样品缓冲液。对于在固体基质中培养的细胞,应首先去除培养基质,用 PBS 或等渗蔗糖溶液清洗细胞层,后者是减少可能干扰一向 IEF 的盐的特别有效的方法。然后通过刮擦方法收获细胞,但应避免使用蛋白裂解酶,或者,加入少量体积溶解缓冲液.将附着在基质上的细胞直接裂解。如果细胞核酸含植过高而导致样品黏度太大时.可用不含蛋白质酶的 DNase/RNase 混合物来处理样品


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