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悬浮细胞克隆的分离

2019.11.12

经验交流(0

实验方法原理用加样枪或 Pasteur 吸管吸取集落,移至培养瓶或多孔板的培养孔中。
仪器、耗材

生长培养基                                                                  多孔板                                                                  培养瓶                                                                  解剖显微镜                                                                  移液器                                                                  粗头笔                                                                  黄色枪头                                                          

实验步骤1. 用倒置显微镜观察培养皿中的细胞,用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔标记出集落。

2. 24 孔板的每一孔中加 1 ml 培养基。

3. 解剖显微镜(20~50× 放大)下挑取集落

(a)每一个细胞集落用一个枪头(加样枪上的黄色枪头)。

(b)将移液器调至 100 μl。

(c)先用枪头吸大约 50 μl 的培养基,将该枪头对准要分离的集落,在集落内轻轻吸取剩余的 50 μl。

4. 将吸取物移至 24 孔板,用培养基冲洗集落,如果培养基中含美希索,集落就会固定、黏附,然后生长;如果培养基含有琼脂,则需用吸管在培养孔内上下吹吸集落几次,分散琼脂。细胞克隆也可以直接移至竖直放置的 25 cm2 的塑料培养瓶中。

                         


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