辐射法分离细胞集落
实验方法原理 | 将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下,用铅块遮蔽需要的集落。 |
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实验材料 | D-PBS 0.25%胰蛋白酶 |
仪器、耗材 | 生长培养基 X射线或钴源 铅块 |
实验步骤 | 1. 选择想要的集落,用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔做记号。 2. 选出一块大小适当的铅块。 3. 将培养瓶拿至放射源处。 4. 将培养瓶倒置放于放射源下方。 5. 用 2 mm 厚的铅块(用 2 mm 厚的铅条切出的直径约 2~5 mm 大小的铅块)遮蔽需要的集落。 6. 用 30 Gy 的辐射强度照射培养瓶。 7. 将培养瓶重新放回无菌环境,撤去培养基,胰蛋内酶消化,使细胞在原培养瓶中重新生长。接受辐射的细胞可作为饲养层细胞。 |
注意事项 | X 射线机或 60Co 源一定要在严格监控下使用, 正确检查以确保自己及他人暴露部位的安全。做此类试验前, 应与地方放射性保护官员取得联系。 |
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