线粒体电镜照片观察实验
电子显微镜常用的有透射电镜(transmissionelectronmicroscope,TEM)和扫描电子显微镜。与光镜相比电镜用电子束代替了可见光,用电磁透镜代替了光学透镜并使用荧光屏将肉眼不可见电子束成像。
实验方法原理 | 线粒体同内质网一样,除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外,其他所有细期线粒体(mitochodri)。一个细胞中线粒体的数目、形状和大小常因细胞和生理状况等不同而有较大的差别,如某种海藻中只有一个线粒体,玉米根品中有100~3000 个,而海胆卵母细胞中线粒体多达30 万个;在光学显微镇粒体呈线状、颗粒状、杆状等,故称线粒体; 大小一般直径为0.5~1.0μm。电镜下可见线粒体外包被双层封闭的单位膜,内含有主要由蛋白质组成的质(stroma,mati),内、外膜并不相连,它们之间相间40~80A 。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 一、线粒体的光镜切片观察
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注意事项 | 在使用透视电子显微镜观察生物样品前样品必须被预先处理。随不同研究要求的需要科学家使用不同的处理方法。 固定:为了尽量保存样本的原样使用戊二醛来硬化样本和使用锇酸来染色脂肪。 冷固定:将样本放在液态的乙烷中速冻,这样水不会结晶,而形成非晶体的冰。这样保存的样品损坏比较小,但图像的对比度非常低。 脱干:使用乙醇和丙酮来取代水。 垫入:样本被垫入后可以分割。 分割:将样本使用金刚石刃切成薄片。 染色:重的原子如铅或铀比轻的原子散射电子的能力高,因此可被用来提高对比度。 展开 |
其他 | 分辨能力是电子显微镜的重要指标,电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的最小间距来表示,即称为该仪器的最高点分辨率:d=δ。显然,分辨率越高,即d的数值(为长度单位)愈小,则仪器所能分清被观察物体的细节也就愈多愈丰富,也就是说这台仪器的分辨能力或分辨本领越强。 |