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牛血清在细胞培养时的注意事项

2021.5.19

  胎牛血清参与细胞培养实验为细胞生长提供必要的营养成分,对于研究细胞的科学人士来说,血清都不会陌生,其中胎牛血清是实验操作的常客。一般而言,胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后,发育未完全的胎牛心脏穿刺采血后,通过一系列工艺处理zui终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。

  各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。

  1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。

  2、蛋白质含量 3.5%~5.0%( w/v)

  3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)

  4、无菌检验 阴性

  5、支原体检验 阴性

  6、细菌内毒素 ≤5(EU/ml)

  7、牛腹泻病毒 阴性

  8、大肠杆菌噬菌体 阴性

  9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)最大增殖浓度≥2.5×106 个/ml

  细胞倍增时间 ≤15h

  克隆率 ≥85%

  如此重要的胎牛血清当然价格也不会很低,怎么才能让它发挥最大作用呢?在使用的过程中都需要注意哪些呢?

  1、注意避免沉淀加入培养液

  添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液,因为如果培养液有沉淀的存在,会使得其中培养的细胞产生大量的黑点,除此之外,细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质,总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了最大程度减少血清的损失,可以把所有有沉淀的血清进行收集并做离心处理,之后便可将上清液加入培养液中使用。

  2、注意解冻的方法

  再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则,因此在解冻血清的时候,要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点,事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来,便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外最好采用国际通用的解方式解冻血清。

  3、注意血清的灭活方法

  胎牛血清的灭活,一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清,那么需要注意的是,加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。而之所以这么做,是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求,客户可以自行选择是否进行灭火处理。

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