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系统性风湿病的临床免疫学试验进展

2021.5.22

自身抗体(autoantibodies)是指直接抗细胞内、细胞表面和细胞外成份的抗体。

(一)细胞内抗原包括核成份和细胞浆成份,常用于免疫风湿病学临床试验诊断的相应抗体有①抗核抗体(antibodies to nuclear antigens, ANAs);②抗细胞浆抗体(antibodies to complasmic antigen, ANCA;如抗中性粒细胞浆抗体(antibodies to neutrophil complasmic antigen, ANCA和抗血管内皮细胞抗体(antibodies to endocelial cell, AECA等)。③细胞表面抗原有人类白细胞相容性抗原(human leukocyte antigen, HLA)及其亚型等。在病理情况下,有些组织细胞也可在细胞膜裸露出各种不同的抗原,并产生相应的自身抗体。抗细胞外成份抗体主要有抗胶原因子和狼疮抗凝物。

目前临床应用检测自身抗体的主要免疫学试验技术种类有:间接免疫荧光法(indirect immune fluorescence, IIF)、直接免疫荧光法(IF)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、酶免疫细胞化学、乳胶颗粒凝集、免疫扩散、免疫电泳、放射免疫检验和免疫印迹技术等。其中,IIF法和ELISA法被广泛用于临床检测直接抗细胞成份和可溶性细胞成份抗体的检测。有时为了弥补试验技术或试剂中可能存在的缺陷以及试验条件的影响,提高试验结果的特异性和敏感性,也用一种方法检测多种自身抗体,或一种自身抗体用多种试验方法检测。

1.ANA ANA,故名思意即抗细胞核成份的抗体,是所有抗核抗体的总称。到目前为止,至少发现有30种抗核成份的抗体,这些核抗原主要分布在细胞刻内,但也有分布在核周的胞浆内。ANA最早用于诊断系统性红斑狼疮,目前作为系统性红斑狼疮和其他系统性风湿病的筛选试验诊断,具有很高的敏感性,但缺乏特异性(表-1)。   

检测ANA的方法有间接免疫荧光和ELISA两种方法,在实验室操作和临床意义方面两者有差异。

(1)间接免疫荧光 常用的底物为有核组织细胞,如鼠肝或鼠肾组织细胞;也用肿瘤细胞株,如子宫颈癌细胞(Hela cell)或喉癌细胞(Hep-2 cell)。由于癌细胞的核更大,增殖活跃,细胞的分裂期明显,故更易观察和分析结果。依照细胞核染色的类型分为:斑点型(specle, S型)、匀质型(difusion, D型)、周边型(peripheral, P型)和核仁型(nucleolei, N型)4型。也有人将其中的斑点型又分为粗斑点型)和细斑点型(即着丝点型,antibody to centromere antigen, ACA),共分为5型。各核型的ANA在不同的系统性风湿病中有各自相对的特异性。少数老年人可有低滴度的ANA阳性。


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