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简述酵母双杂交系统的应用

2022.10.30

  酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性。

  主要是由于:

  ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达。

  ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度。

  ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定。

  ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大。同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感。

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