高效液相色谱仪检测富马酸和马来酸的含量
在选定的工作条件下，采用高效液相色谱柱分离，紫外吸收检测器检测，外标法定量，计算样品中富马酸和马来酸的含量。
1.试剂和材料
富马酸：质量分数≥99.0％。
马来酸：质量分数为99.0%。
氢氧化钠溶液：20g/L。
磷酸盐溶液：将磷酸盐（优良等级纯度）（1?0.02）mL加入到1000mL容量瓶中，100mL甲醇（HPLC级，可根据柱效应进行调整），用水稀释至刻度，然后用0.45μm滤膜过滤。
2.仪器和设备
高效液相色谱仪系统（HPLC）
高压泵：无脉冲，可保持0.1毫升/分钟至10.0毫升/分钟的流量。
定量环：5μL。
紫外光检测器：可变波长。
数据处理系统：色谱工作站或数据处理器。
抽滤系统
过滤系统采用纤维素酯膜滤纸（用于流动相预处理)孔径0.45um。
过滤系统
过滤系统使用孔径为0.45μm的纤维素酯膜滤纸(用于样品预处理)
进样器
自动或微量注射器，50或100毫升。
3.色谱分析条件
推荐的色谱柱和典型色谱条件富马酸和马来酸测定典型高效液相色谱仪各组分的相对保留时间其他色谱柱和操作条件可以达到相同的分离度。
4.分析步骤
标准样品溶液的制备
富马酸标准样品溶液的制备
富马酸盐50 mg，准确至0.0002克，溶于适量水(如有必要，加入少量氢氧化钠溶液)，转至50 mL容量瓶中，用磷酸溶液稀释成垢。取下上述溶液（1+0.02）ml，并将其放入容量为50 ml的瓶中。用磷酸将溶液稀释到刻度。好好摇一摇。用0.45um滤膜填充，然后用超声波除气。
马来酸标准样品溶液的制备
马来酸50 mg，准确至0.0002g，溶于适量水(必要时加入少量氢氧化钠溶液)，转至250 ml容量瓶，用磷酸盐稀释成规模化。取下上述溶液（1+0.02）ml，放入100 ml容量瓶中。用磷酸将溶液稀释到刻度。好好摇一摇。用0.45um滤膜填充，然后用超声波除气。
样品溶液的制备
0.2 g实验室样品，准确至0.0 0 2 g，置于50 ml容量瓶中，流动相稀释，摇匀，用0.4 5μm滤膜过滤，再用超声波脱附。测定
根据高效液相色谱操作规程，调整温度和流速，使其符合分析条件，基线稳定后，注入标准样品溶液用微量注射器取标准样品溶液5μL和注射液(或自动进样)记录富马酸或马来酸的峰面积A2。
用5毫升的微型取样器对样品溶液进行取样，并记录待测物质的峰面积a
5.结果计算
对富马酸或马来酸的质量分数2用%表示按公式计算：
式中：
A1样品液中待测物质的峰面积；
标准样品溶液中富马酸或马来酸的2峰面积；
M2标准样品溶液中富马酸或马来酸的注射量g；
m样品体积（单位：微克）
