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实验室仪器--如何提高移液器的准确度

2021.12.30

良好的移液操作规范可以直接影响到实验的成功和可重现性

1.选择合适的量程,可提高1%的移液准确性

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对特定的一支移液器,其移液的准确性随移液量的降低而降低。因此在10%-100%量程范围内可以操作,最佳量程范围是35%-100%。不要用大量程的移液器移取小体积的液体,否则移液准确性将下降1%。

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2.正确的量程设定,可提高0.5%移液准确性

 当把大量程调为小量程(如从200ul调到100ul)时,直接调节到位即可;当把小量程调为大量程时,需先超过所需量程1/3到1/2圈,然后再回调到所需的量程。这样做是为了消除移液器本身的机械误差,提高0.5%的移液准确性。

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3.润洗吸头,可提高0.5%的移液准确性

在正式移液前,先用吸头吸取待转移的液体,然后再把它作为废液排掉。润洗吸头的目的是减少吸头内壁吸附力对准确性的影响,可提高0.5%的移液准确性

4.正确的吸液速度,可提高5%的移液准确性

吸液速度:在吸液过程中,须慢慢降低拇指的下压力,使液体在吸头内均匀且缓慢的上升;对于大量程和高粘度移液,在吸液时松开拇指后,须使吸头在液体内停留3-5秒后才能移出。不正确的吸液速度会导致至少5%的准确性下降!

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5.正确的吸液角度,可提高0.5%的准确性

(微量程移液器可达2.5%)

在移液的过程中须一直保持移液器在竖直状态,最大倾角不超过20°(一般有倾角会导致实际吸液量偏大)。

6.正确的吸液深度,可提高1%准确性

(微量程移液器可达5%)

在吸液过程中,如果吸头浸没过多,额外增大的压力会使多余的液体被移液器吸入,并且过分浸入会导致外壁残留液体增多从而造成移液量值偏高;如果吸头浸没高度不足,空气将会随液体吸入吸头内,从而产生气泡造成量值偏低;

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7.良好的分液技巧,可提高1%的准确性

我们在分液的时候,可以将吸头先接触容器内壁,使其沿容器内壁向上滑动,避免液体粘在枪头上。另外,液面上分液,液面分液和液面下分液三种方法同样也适用于非粘性溶液。液面下分液主要用于小量程移液器的分液,注意一定要在吸头从液体中移出后才能松开拇指。

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8.在恒定温度下移液,可提高5%的准确性

经过长时间的移液,您手上的温度会使移液器变热,移液器也会热胀冷缩啦。它内部的空气一膨胀,吸液量增加,结果就会不准确。理想的移液温度为21.5℃(±1℃)。您的仪器和样品的温度应与工作的室温相同,如果可以的话建议使它们先平衡20分钟。在恒定温度下移液器又可以将结果改善高达5%啦!

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