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关于脂肪干细胞的分离和培养介绍

2022.10.26

  将脂肪组织冲净,称重后消化。当消化完成后,弃掉上层未消化的脂肪组织,将下层的细胞悬液以1500 r/min(375g),离心10 min 后弃上清,得到离心管底部的脂肪干细胞团,将其重悬,密度调整到1×105mL-1,然后接种在培养面积为25 cm2 的细胞培养瓶中。

  当干细胞长满培养瓶后按一传二进行传代,具体的传代方法是:首先,用D-Hanks 冲洗一遍细胞,然后加入2 mL 的混合酶溶液(0.25%胰酶和0.02%EDTA)消化,当在显微镜下观察到细胞发生明显的变形,缩成球状后,立即用含有10%胎牛血清的培养基中止消化,并用吸管轻轻吹打瓶底部,确保细胞完全脱落分离到悬液中,再把细胞悬液置于离心机上,以1000 r/min (167g),离心5 min。最后,将离心得到的细胞团重悬,调整密度为合适密度进行接种。

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