MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程
MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程
1、选择Xe灯，打开ALX-250稳定10分钟，将ALX-250的功率调整到150 W；
2、在打开ALX-250的同时，打开仪器电源，先开MM-450，再开PMS-450。机器预热10min；
3、 清洗好样品池，添加待测样品的空白溶液（如水或缓冲盐）到样品池中。
4、 安装上样品池盖。
5、 如果测量波长小于210nm，需要对仪器进行氮气吹扫处理。打开氮气，调整流量计流速为1000L/h，通氮气几分钟。确认电源线插在氙灯的位置，并且氙灯已对准光路，具体操作见光源的选择操作说明。然后打开ALX-250光源开关，将氮气流量计流速设为400L/h，查看ALX-250面板显示，当氙灯能量达到150W，氙灯稳定。如果无需氮气吹扫，直接打开ALX-250电源，等待氙灯稳定后进行下一步操作。
6、 点击电脑桌面上的图标，进入BioKine软件操作主界面。
7、 点击图1主界面的Device/Scanning Spectrometer，进入光谱扫描界面，如图2。
7. 点击主界面上方的按钮，进行光谱测定参数的设定，如图3。
Acquisition mode：选择测量模式CD。
Begin(nm)：扫描初始波长
End(nm）：扫描结束波长
Scan Repeat ：扫描次数
Acquisition duration：每个nm的测量持续时间，范围0.5s-20s，此项相当于扫描速度的设定。园二色谱扫描速度不能低于0.5s。使用emission 单色器，扫描速度为1nm/s
ShutterAutomatic mode：选择Always open，挡板处于始终打开的状态。
PM gain*10：当在非常低的信号测量，可选择此项，进行信号的增益。
CD parameters：CD的灵敏度，根据信号的振幅设置，有四个不同的选项，1000、300、100和30 mdeg。
其他选项根据需要可以选择。
以上参数都设置好后，点击OK按钮，参数设置完成，回到主界面。
8. 在要测量波长的范围内取一个波长点，输入到图2下方的Ex处，点击Enter键。这时确认按钮变为，然后点击，自动调整HV电压，然后再点击按钮，锁定此电压值。电压值一般小于800V。
9. 空白的测量
点击图2主界面Blank spectum区域的Record按钮，记录第一步添加的空白样品谱图，空白谱图显示在主界面中。测量后选择Subtract复选框，将在随后的样品光谱的测量中扣除空白值。
10. 样品的测量
再点击
按钮，关闭挡板，取出样品池，将空白样品换成被测样品，然后再放回到样品支架上，盖好样品仓盖。这时再点击，打开挡板。点击图2主界面Acquisition control区域的按钮，记录样品的园二色谱图，显示在图2主界面中。
11. 谱图的平滑
第十步测量的谱图为样品园二色原始测量图，需要经过平滑处理，得到平滑的曲线图，操作如下：
选择主界面Analysis菜单，这时界面变为分析界面，选择Tools菜单下的Smoothing命令，出现平滑的设置界面，选择第二项。
选择平均平滑点数，此数值必须是奇数，然后点击Proceed按钮，这时平滑后的曲线出现在界面中。
12. 保存数据
选择主界面的File菜单下的Save As…，出现图5界面。
选择要保存文件到哪个文件夹，并给文件命名，选中Save as text，然后点击Save按钮，文件保存到指定的文件夹中。
13. 如果对园二色数据需要进行蛋白质二级结构分析，进行如下操作：
在BioKine软件中选择File菜单的Load data file命令，打开要进行分析的文件，然后选择File菜单的Exprot data to/Dicroprot file命令，如图6，导出数据文件为Dicroprot的文件。
出现图7所示界面，选择导出数据要保存的文件夹并命名此导出数据，并根据测量的具体情况填入相应的信息，点击Export按钮，数据导出结束，关闭图7界面。
