高速逆流色谱法分离制备蓖麻籽中的蓖麻碱
摘 要：利用高速逆流色谱法对蓖麻籽中蓖麻碱粗提物进行纯化，以液相色谱对纯化结果进行检测，用质谱、核磁对纯化产物进行结构确定。去壳后的蓖麻籽经过石油醚- 乙醚(2:1，V/V)脱脂，以95% 乙醇索式提取，所得产物浓缩、冻干后得到蓖麻碱粗提物。采用三氯甲烷- 甲醇- 水(2:1:1，V/V)两相溶剂体系对粗提物进行高速逆流色谱纯化一次进样100mg，可得到74mg 样品。纯化所得主要组分经面积归一化法确定其纯度达到99.62%。质谱、核磁验证纯化产物为蓖麻碱。高速逆流色谱可用于大量制备高纯度蓖麻碱。
关键词：蓖麻籽；蓖麻碱；两相溶剂体系；高速逆流色谱；纯化
蓖麻(Ricinus cammunis L.)为大戟科(Euphorbiaceae)蓖麻属植物，是世界十大油料作物之一，在全世界广为种植，主要产区是印度、中国、巴西等，其产量占全世界蓖麻总产量的90% 以上。我国蓖麻的主产地为内蒙古、吉林、山东、山西等。蓖麻籽中含有5 0 %左右的蓖麻籽油，榨油后的蓖麻粕含有35% 左右的蛋白质[ 1 ]。一方面，由于蓖麻粕中含有蓖麻碱、蓖麻毒蛋白、血细胞凝集素、变应原类毒素等[ 2 ]，限制了其利用；另一方面，蓖麻碱、蓖麻毒蛋白等都具有一定的生物活性，拥有广泛的开发应用前景。蓖麻碱作为蓖麻中的毒性成分之一，其生物活性主要有改善记忆、保肝护肝等，此外还可以作为杀虫剂和杀线虫剂，用作生物农药[3]。目前主要通过有机溶剂提取，通过结晶获得纯度较高的蓖麻碱纯品[3-6]。蓖麻碱在蓖麻粕中的含量约为0.3%～0.4%，在蓖麻籽壳中的含量约为1.5%[1]，传统方法制备蓖麻碱得到的蓖麻碱纯度不高，结晶过程繁琐，制备量小，且损失大。高效逆流色谱(HSCCC)作为一种进样量大、分离能力强、分离时间短、样品损失小，以及分离和纯化可同步完成的分离技术，与以往的技术手段相比具有明显的优点[7-8]，越来越受到制备工业的重视，已经广泛地应用于生物医药、食品、化学等领域。本实验尝试利用制备型高速逆流色谱对蓖麻籽中的蓖麻碱进行纯化与制备，摸索蓖麻籽制备纯化蓖麻碱的最优条件，以期为基准物质研究和进一步的生物活性研究提供高纯度的蓖麻碱。
