分析测试百科网 > 行业资讯 > 技术原理

病毒的血清学实验——病毒红细胞凝集试验

2019.4.09

实验方法原理	有些病毒（如流感病毒等）表面有血凝素（为糖蛋白）在一定条件下，能与鸡，豚鼠的红细胞表面的糖蛋白受体结合而发生凝集现象。利用病毒血凝试验可以检测某些病毒的存在，滴定病毒的血凝效价，便可大致估计病毒颗粒的数量（1 个血凝单位=106病毒颗粒）。若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合后，使病毒失去凝集红细胞的能力，从而抑制血凝现象的出现，此为血凝抑制现象。
实验步骤	1. 取一块洗净晾干的20 孔凹窝塑料板，用蜡笔做好标记。用带有橡皮吸头的吸管，于1～6 孔内各加人生理盐水0.2 ml，在第1 孔内加入已经稀释成1：5 的流感病毒尿囊液0.2 m1，混匀后吸出0.2 ml 至第2 孔，再混匀后吸0.2 ml 至第3 孔，如此稀释到第8 孔（病毒稀释度即分别为1：10～1280），自第8 孔吸出0.2 ml 弃去（弃于消毒缸中），第9 孔不加流感病毒尿囊液，作红细胞对照。 2. 每孔加人1% 鸡红细胞0.2 m1，摇匀后置室温45 分钟。 3. 观察结果时，直接观察塑科板孔内的红细胞凝集式样，判断结果并作记录。最高病毒稀释度呈\"++\" 凝集者作为病毒的红细胞凝集滴度，亦即1 个血凝单位。例如1：320 为" ++"，即为1 个血凝单位，在红细胞凝集抑制试验中，病毒血凝素需用4个单位，按上例1 个血凝单位为1：320，则1：80 含病毒的尿囊液即为4 个血凝单位。展开
注意事项	1. 用反复吹吸法稀释混匀病毒或血清时，手法要轻，稳，尽量减少气泡出现； 2. 为了实验准确，加红细胞时，应从最后一孔起向前加； 3. 加样毕，可将塑料板放光滑台面上慢慢划圈摇匀，但要防止溅出；观察结果时，塑料板底部垫上白纸，减少移动并按时观察，若延续时间太长，则可能出现病毒凝集红细胞后再解离的现象，从而影响结果观察。