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全自动氨基酸分析仪的检测方法

2018.9.14

氨基酸是构成蛋白质的基本单位,氨基酸是构成生物体蛋白质并同生命活动有关的最基本的物质,是生物体内不可缺少的营养成分之一,能够有效地调节生理机能、催化代谢、供应能量等。因此,广泛应用于食品、饲料、医药质量监控、生化研究、临床研究等领域。

由多种氨基酸组成的复方制剂在现代静脉营养输液以及“要素饮食”疗法中占有非常重要的地位,对维持危重病人的营养,抢救患者生命起积极作用,成为现代医疗中不可少的医药品种之一;对农作物、食品、饮料中氨基酸含量进行检测;对各种饲料必需氨基酸的含量和它们之间的比例必须恰当,测定原料和产品中的氨基酸含量,以达到保证质量的目的。

目前,主要采用全自动氨基酸分析仪对氨基酸各项指标进行检测分析,以下简单介绍武汉恒信世纪科技有限公司自营生产研发的HX-1800全自动氨基酸分析仪的检测方法及步骤。

 

一、样品处理

(1)测定样品中各种游离氨基酸含量,先除去脂肪杂质;              

(2)测定蛋白质的氨基酸组成时,样品必须经酸水解,使蛋白质完全变成氨基酸。

 

二、样品分析

将处理后的样品通过自动进样器输送到色谱柱中进行分离。采用不同pH值离子浓度的缓冲液将各氨基酸组分依次洗脱下来,再逐个以另一流路的茚三酮试剂混合,然后共同流至螺旋反应管中,于一定温度下(通常为115~120℃)进行显色反应,生成的紫色物质在570nm 波长下进行比色测定。而生成的黄色化合物在440nm 波长下进行比色测定。最后自动计算机给出精确的数据。仪器精确度在±1~3%。

 

三、结果分析

带有数据处理机的仪器,各种氨基酸的定量结果能自动打印出来,或用尺子测量峰高或用峰高乘以半峰宽确定峰面积进而计算出氨基酸的精确含量。另外,根据峰出现的时间可以确定氨基酸的种类。

 

四、检测技术参数及指标

   (1)色谱柱 

        尺寸: 4.6mm ID × 60mm       

        粒度:5μm 专用阳离子交换树脂 

   (2)输液泵 

        方式:双柱塞往复泵    

        压力: 0-42Mpa     

        流量: 0.0001-10,000ml/min

   (3)自动进样器 

        方式:直接进样  

        样品瓶容积:1500μl  

        样品瓶数:200  

        进样量:0.1-100μl 

(4)柱温箱 

         方式:半导体制冷加热   

         温度:20-85℃(有断电和散热器过热保护装置)

(5)反应单元 

         方式:反应柱    

         尺寸:4.6mm ID 40mm   

         填充材料:金刚砂惰性材料

     温度范围:50-140℃(有过热断电保护装置 

(6)可见光度计: 

         单色器:全息凹面衍射光栅 

     波长:570nm,440nm(700nm参比) 


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