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神经组织染色实验——神经纤维染色

2019.4.06
实验方法原理神经纤维是由神经元的轴突和树突等成分组成,经过银染后,再用还原剂处理,使银颗粒沉着于纤维和细胞中。常用 Bielschowsky 染色法。
实验材料

石蜡组织切片

试剂、试剂盒

硝酸银水溶液无水乙醇浓氨水蒸馏水二甲苯乙醇中性树胶氯化金水溶液甲醛硫代硫酸钠

仪器、耗材

滤纸37℃ 温箱

实验步骤


氨银溶液:20% 硝酸银水溶液 30 ml,无水乙醇 20 ml。将此两液混合后呈现乳白色沉淀,逐滴加入浓氨水,使之形成的沉淀刚刚溶解,再滴加 5 滴浓氨水,过滤后使用。


1. 石蜡组织切片厚度 8~15μm,常规脱蜡至水。


2. 蒸馏水洗 1~2 min。


3. 2% 硝酸银水溶液在 37℃ 温箱内浸染 25~35 min。


4. 蒸馏水洗 2~3 min。


5. 用 10% 甲醛溶液还原数秒钟,至切片呈现黄色为止。


6. 蒸馏水洗 3 min,用氨银溶液滴染 20~40 s。


7. 倾去染液,直接用 10% 甲醛溶液再次还原 1~2 min,使之切片呈棕黄色。


8. 蒸馏水洗 3 min,0.2% 氯化金水溶液处理 3 min。


9. 蒸馏水洗 1 min,5% 硫代硫酸钠水溶液固定 3~5 min。


10. 水洗 3~5 min,然后用滤纸将切片周围水分吸干。


11. 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

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注意事项


1. 由于神经纤维的组织切片较厚,为防止脱片现象,所以最好用涂胶的载玻片进行捞片。


2. 氨银溶液作用后,切片上应保留些银液,便于甲醛还原,使纤维着色较深。

其他

结果:神经元、轴突及神经纤维呈黑色。


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