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高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法

2020.1.06

高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法:
    1.以0.5ml/min的流速用正己烷-乙腈(99∶1)洗涤柱体积10次,然后用氯仿、异丙醇和甲醇-水依次冲洗柱子。
    2.以0.5ml/min的流速用30倍体积的ph 11.0氢氧化钠溶液注意ph值不得超过11.0冲洗柱然后立即用水0.5ml/min,30倍体积柱冲洗用流动相代替。
    3.在制备流动相时,每一组分应分别测量,较小的组分应精确测量,pH值应调整为0.1。
    4.在反相使用时,应特别注意控制ph值的范围。ph值越低,水解就越危险。水在流动相中的比例越高,发生水解的危险性就越大。pH范围为pH3.07.0;
    5.如果要使用的流动相中有缓冲盐,建议在使用分析流动相之前,应以相同的流动相比例过渡无缓冲盐的流动相,以避免缓冲盐在分析柱中沉淀。

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