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全自动生化分析仪的测定要求

2021.5.09

  1.样品:血清、尿液、脑脊液等。

  2.试剂:单试剂、双试剂

  3.双波长:由主波长和副波长构成的两个波长。可以消除在检测过程中的干扰。

  4.校准品(标准):比对未知样品的浓度

  5.质控品:用于生化仪在日常工作中对仪器、试剂等方面状态的监控。[2]

  方法

  1.终点法(endessay)完全被转化成产物,不再进行反应达到终点,取反应终点的吸光度来计算被测物质的浓度。生化检验中除酶和BUN、CRE外几乎都用终点法来进行检测。

  1).一点终点法:取反应达终点时的一个点的吸光度来计算结果。

  2).二点终点法:取反应尚未开始时读取一个点的吸光度,待反应达终点时再取第二点的吸光度。用第二点吸光度减去第一点吸光度的差值来计算结果。主要用于扣除试剂和样品空白。保证结果的准确性。一般双试剂用。

  2.固定时间法(两点法):是取尚在反应中的两点间的差值来计算结果。此两点既不是反应起始点也不是终点。主要用于检测一些非特异性的项目,如肌酐。

  3.连续监测法(动力学法、速率法):是在测定酶的活性或酶代谢产物时,连续取反应曲线中呈线性变化吸光度值(△;A/min)来计算结果。因在反应线性时间内各点间的吸光度差值为零故又称谓零级反应。[2]

  测试项目

  1.肝功类

  GPT/ALT(谷丙转氨酶) ALP(碱性磷酸酶) Alb(白蛋白)

  GOT/AST(谷草转氨酶) T-Bil(总胆红素) CHE (胆碱脂酶)

  TTT (麝香草酚浊度) D-Bil(直接胆红素) FB(纤维蛋白原)

  NH3 (血氨) TP(总蛋白)

  2.肾功离子

  BUN(尿素氮) K(血清钾) Na(血清钠)

  Cr(肌酐) Fe(血清铁) Ca(血清钙)

  UA(尿酸) Mg(血清镁) Cl(血清氯)

  CO2-Cp(二氧化碳结合力) Zn(血清锌) P(血清磷)

  血糖血脂 T-CHO(总胆固醇) HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)

  TG(甘油三脂) LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)

  GLU(血糖)

  3。心肌酶谱

  CK(肌酸激酶) CK-MB(肌酸激酶同工酶)

  LDH(乳酸脱氢酶) HBDH(α-羟丁酸脱氢酶)

  GOT(谷草转氨酶)

  4。胃萎缩性胃炎筛查

  PGⅠ/PGⅡ(胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ)

  5。其他

  a-Amy a淀粉酶 Hb血红蛋白 免疫球蛋白、毒物、类风湿因子等用光学比浊法的都可以用在全自动生化上进行检测。[2]

  国内外的生产厂家

  国外主流厂家:东芝 日立奥林巴斯西门子贝克曼欧霸

  国产一线厂家:迈瑞 优利特锦瑞 上海科华 上海丰汇 深圳恩普 深圳蓝韵(Landwind) 北京松上 永和阳光 长光东软迪瑞华天恒达博科 库贝尔。[2]

  仪器选购

  各级医疗单位选购ACA仪器时,主要应作以下几点考虑:机型的适用性;性能价格比;试剂开放性;地区差异;售后技术支持。其中,机型的适用性是指选购单位应依照实际情况,选择略大于现工作量要求的ACA系统,以适应单位未来发展的要求,同时考虑自身经济实力,力求一步到位,在仪器的7-8年生命周期内不被淘汰,这也体现了性能价格比的要求。例如,各类医院选购ACA应选购1000 tests/hour的机型,或者可后续扩充至1000 tests/hour以上,以满足临床需要。地区差异和售后技术支持这两个问题涉及面广,不好一概而论,主要应考虑:本地区该机型的销售状况,现有同类、同种机器的台数以及销售商及生产厂商的口碑。作者认为,大型、中型城市销售、代理商比较集中,维修及后续支持较能保证,可着重考虑选购性能价格比较优的仪器,而小型城市、乡镇医疗单位则应考虑选用多模块组合、可独立使用的仪器。万一其中部分模块故障,其余模块仍能正常运转,保障科研医疗的正常开展。当然,选购时要注意仪器各模块是否独立性好,公用模块足够简单、不易故障,经验告诉我们,模块化ACA的公用部分越少,独立操作的可能性越大。

  仪器的选购是一件复杂的工程,各单位应认真调研,公开竞标,切不可因小失大带来不必要的损失。[1]

  试剂问题

  混成单一

  比如酶法肌酐试剂,第一步R1中的酶要消除样品中内源性肌酸的干扰,如果混成单一试剂,则会使检测结果偏高,消除法HDL、LDL也不能混成单一试剂,因为它们都要分别清除HDL和LDL以外的脂蛋白,从而达到检测的目的,如果混成单一试剂,则会使测定的HDL和LDL不准确。另外,有的试剂混成单一试剂后,稳定性和抗干扰能力也会明显下降。解决办法:①在仪器通道或试剂位允许的情况下尽量使用双试剂;②如一定要使用单一试剂,最好选择试剂厂家针对部份项目专门生产好的单一试剂。

  开瓶

  随着全自动生化分析仪的普及,“开瓶稳定性”也随之受到了大家的重视,但是就目前有的试剂方法学来讲,还达不到人们所要求的试剂开瓶后在仪器内放很长时间不需要定标,比如ALP、TP、GSP等PH为碱性的试剂,开瓶后试剂会吸收空气中的二氧化碳,使试剂本身的PH值下降,如果长时间开瓶不定标或校准,会使检测结果发生偏离,在国外有的项目有明文规定,必须72小时之内定标,比如BUN。但是在国内的某些实验室为了方便,很长时间都不作校准,导致测定结果的不准确。解决办法:了解试剂的特性,及时对部份项目进行校准,对于每天标本量不多的医院,可按1~2天的用量取用试剂放入仪器。

  相混

  将不同批号的试剂混合在一起使用的现象在检验中经常发生,当然这一方面是为了节省成本,另一方面为了方便。但是不管是什么品牌、什么试剂,由于不同批号的试剂生产时间不同,试剂中工具酶的活性会有差异,会发生水解的底物浓度随时间长短也会不同。因此混在一起使用而又不定标,可能会导致检测结果的不准确。还有如果有的试剂开瓶时间太长,空气中的灰尘或细菌会进入瓶中,由于有的试剂含有大量的蛋白质和盐,是细菌生长的最好条件,虽然有的试剂添加了防腐剂,但防腐剂的防腐也是有一定限度的,而且绝大多数厂家的试剂中是没有加防霉剂的。解决办法:① 不同批号试剂建议不要混用,如果混用最好重新定标;②试剂瓶在仪器内使用时间不要过长,及时更换。③一般每个试剂瓶内由于试剂针不能吸完,或多或少都会留有几毫升的试剂,如果是同一批号可以将未开瓶的同一批号试剂往里倒。但如果不是同一批号的试剂时倒人后最好定标,最好的做法是将每个批号的剩余试剂留起来待一定数量后混在一起,然后重新定标后检测。[2]

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