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细胞冻存与复苏过程,应注意哪些细节

2023.9.21

首先说一下细胞在冻存过程中的主要威胁:

  1. 溶液效应:

    原理和内容如图所示

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  2. 胞外冰晶形成

    冻存过程中细胞外形成胞外冰晶的形成会对细胞膜造成机械性损伤

  3. 脱水

  4. 胞内冰晶形成

    原理和内容如图所示

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因此在细胞冻存复苏过程中,要从以下几个方面防止上述损伤形成:

  1. 总的原则:慢冻快融,即冻存过程要逐步降温,能够使用程序降温仪当然最好了;复苏过程水温要控制适当,一般选择38℃,复苏过程要注意不断摇晃以缩短时间;

  2. 选择恰当的冻存保护剂,通常有DMSO,人血白蛋白,甘油,羟乙基淀粉,海藻糖,丙二醇等等,这个最好能自己通过多次摸索,找出一个适合自己所培养类型的细胞的稳定最优的配比组合;

  3. 冻存保护剂要提前预冷,滴加过程要缓慢等;


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