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环境对荧光检测的影响

2020.3.13

 
分子所处的环境,如温度、溶剂、pH值等都会影响分子结构和立体构像,从而影响荧光强度。
1.温度: 一般来说, 大多数荧光物质的溶液随着温度的降低,荧光效率和荧光强度将增加,相反,温度升高荧光效率将下降。
2.溶剂: 同一种荧光物质溶于不同的溶剂,其荧光光谱的位置和强度可能会明显的不同。一般情况下,随着溶剂的极性增加,荧光强度将增强。
3.pH:溶剂pH值的影响,当荧光物质是弱酸或弱碱时,溶剂pH值对荧光强度有较大的影响。
4.猝灭剂的影响:荧光猝灭是指荧光物质与溶剂或其他溶质分子相互作用,引起荧光强度降低、消失或荧光强度与浓度不呈线性关系的现象。引起荧光猝灭的物质称为猝灭剂。 

荧光定量分析条件应选择线性范围:当荧光物质溶液的吸光度A≤0.05时,荧光强度与浓度才呈线性关系。选择 合适的激发光和荧光波长:一般选择 激发光谱中能产生荧光的入射光波长作为激发光,荧光光谱选择荧光的波长作为荧光测定的波长。原子吸收、原子发射技术


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