如何识破各种污染拯救细胞？（一）
小伙伴们遇到过这种情况吗？
当您的课题进行到白热化程度时
却发现细胞被污染了
此时大家的心情可谓五味杂陈
形容一下就是
问君能有几多愁，眼泪恰似一江春水向东流
不过，别担心
逍鹏生物炼就火眼金睛
帮助大家识破各种污染，拯救您的细胞
我们先来看看污染的真面目，总结下来无非以下几种类型：
我们一起来分析它们的特征：
1真菌-深藏不露
真菌之所以深藏不露，是因为它们一般不会导致培养基变浑浊，所以在污染早期，很难发现它们的踪迹。直到长到一定规模后在镜下可观察到分叉细丝状的菌丝（有些呈管状，树枝状，串珠状的菌丝）（如图1，图2）。这类污染中，为首的污染代表是酵母菌：显微镜下常见成串的珠状物，形态呈卵形，大约比细胞小5~10倍，当其进行出芽生殖时，会聚集成连体结构；爆发污染严重时，会造成培养基pH值改变，不易除去。
图1. 真菌污染 图2. 真菌污染
逍鹏生物可提供以下解决方案：
表1.产品列表
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产品名称-中文名称 |
货号 |
作用种类 |
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两性霉素B，250mg/ml |
真菌，酵母菌和霉菌 |
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两性霉素B，2500mg/ml |
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制真霉素，10000units/ml |
真菌，酵母菌和霉菌 |
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青链双抗（青霉素-链霉素） |
对革兰氏阳性菌G+，革兰氏阴毒性G- |
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青链双抗（青霉素-链霉素）10X浓缩 |
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青链霉素，制真菌素三抗 |
真菌、酵母菌和霉菌、G+、G- |
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青链霉素，两性霉素B三抗 |
真菌、酵母菌和霉菌、G+、G- |
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青链霉素，新霉素三抗 |
真菌、酵母菌和霉菌、G+、G- |
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硫酸庆大霉素溶液，50mg/ml |
对革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌，支原体 |
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卡那霉素溶液，10mg/ml |
对革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌，支原体 |
细菌-屡见不鲜
细菌种类繁多，分布广泛，是最容易污染细胞的微生物。
细菌在显微镜下呈黑色细沙状（如图3），典型特征是，可以使培养基在短时间内变成黄色或白色浑浊。细胞形态会出现多角，多核状况；贴壁细胞不附着，停止生长甚至死亡。
图3. 细菌污染
逍鹏生物可提供以下解决方案如上表1：
3支原体-无孔不入
支原体之所以无孔不入是因为它们种类繁多，常以寄生或腐生营养方式生长，广泛存在于环境之中。
支原体是细胞培养过程中的常见污染，经常来源于实验人员（支原体常见于人体皮肤、呼吸道、生殖道和消化道）、动物源血清及胰酶、消毒不完全的器具。其大小只有0.15~0.3μm，所以能通过一般标准的细胞培养过滤方法，0.22μm过滤膜。其污染特征不是很明显，增长速度相较于细菌比较缓慢，污染初期（轻微）培养基可能依然清澈不会变黄，所以轻微污染时不容易用常规方法（细胞外观观察或是DNA染色法）确认。
支原体会缓慢改变细胞形态、增殖、基因表达、蛋白合成及代谢反应，它携带的DNA/RNA与蛋白更可能造成QPCR、Western Blot或外泌体实验结果偏差。
如下图所示：
图4. 支原体污染
