聚丙烯酰胺凝胶中DNA的染色检测
实验方法原理 | 与琼脂糖凝胶不同,聚丙烯酰胺凝胶灌制时不能加入溴化乙锭,因为此染料会影响丙烯酰胺的聚合。然而,电泳后可用溴化乙锭进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。由于聚 丙烯酰胺会猝灭溴化乙锭的荧光,所以检测 DNA 的灵敏度降低。电泳后也可用核酸染料SYBR Gold ( Molecular Probes) 进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。它也不能在聚合过程中掺入到凝胶中,这样会妨碍 DNA 的迁移并使 DNA 条带变形。亚甲蓝染色检测的灵敏度低,但较之前两种染料价格低廉,也可选用。 |
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试剂、试剂盒 | 溴化乙锭溶液 SYBR Gold 贮存液或亚甲蓝贮存液 |
仪器、耗材 | 聚丙烯酰胺凝胶 |
实验步骤 |
一、材料 展开 |
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