DNA的凝胶电泳（gel electrophoresis）
一、原理
琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶是分离和纯化DNA片段的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离小分子的核酸；琼脂糖凝胶孔径较大，被应用于大分子核酸的分离和纯化。在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶（EB）染色，在紫外光下至少可以检测出1~10ng的DNA条带，从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。
二、实验试剂
硼酸 Tris碱EDTAEB琼脂糖溴芬兰等
三、实验步骤
(1)稀释缓冲液的制备用5XTBE配置成0.5×TBE稀释缓冲液,待用。
(2 ) 胶液的制备称取0.4g琼脂糖，置于200ml锥形瓶中，加入50ml 0.5×TBE
(3) 稀释缓冲液，放入微波炉（或电炉）上加热至琼脂糖全部熔化，取出摇匀，此为0.8%琼脂糖凝胶液。
(4) 胶板的制备将有机玻璃胶槽两端分别用橡皮膏紧密封住。将封好的胶槽置于水平支持物上，插上样品梳子。向冷却至50～60℃的琼脂糖胶液中加入溴化乙锭（EB）溶液，使其终浓度为0.5μg/ml。
(5) 加样取5 μl提取的植物DNA溶液与2μl 6×上样液混匀，用微量移液枪小心加入样品槽中。
(6) 电泳加完样后，合上电泳槽盖，立即接通电源。控制电压保持在60～80V，电流在40mA以上。
(7) 染色未加EB的胶板在电泳完毕后移入0.5μg/ml的EB溶液中,室温下染色20～25分钟。
(8) 观察和拍照在波长为254nm的长波长紫外灯下观察染色后的或以加有EB的电泳胶板，并绘区带电泳图制。
【注意】溴化乙锭是强诱变剂，具有高致癌性，要求在整个操作过程中必须带一次性手套。
三、相关试剂配制
（1） 5xTBE缓冲液(100ml)：Tris-base5.4g
硼酸2.75g
0.5M的EDTA(pH8.0) 2ml
用灭菌水定容至100ml
