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高通量核酸提取组合方案(二)

2020.7.01

标准组件已经可以完成核酸分离纯化过程,可进行全血,血清的核酸提取以及PCR产物纯化。各种选用组件主要用于各种不同来源材料的前处理过程。

以全血DNA提取为例,介绍提取过程以及过程中每个组件的功能:

 

1.       血样从采血管手动转移到96孔盘:
这步操作最为复杂,一方面采血管的规格不同于96
孔盘,另一方面,血样存在血块容易堵塞吸头。
这步进行自动化操作,成本很高,技术难度很大。目前仅限几家大型的工作站厂家。

2.       加入磁珠和蛋白酶,然后裂解液,并吸喷混合:
由Medusa96移液器来完成。
溶液可放在各种规格的溶液槽中。

3.       加热到50℃并震荡孵育10分钟:
由微孔板恒温振荡器来完成,充分裂解样品并吸附DNA。

4.       放于磁铁盘上吸附1-2分钟,然后吸去废液:
磁铁盘放在Medusa96的盘面上,由用户操作吸液头将废液给吸去。

201112814457.jpg

5.       加液,震荡,磁吸,去废,重复多次
由Medusa96来承担移液的任务;微孔板恒温振荡器对磁珠进行充分洗涤。

6.       加液,震荡,磁吸,收集,完成提取
由Medusa96来承担移液的任务;微孔板恒温振荡器对磁珠进行加热洗脱。

 

整个过程大约只需要60分钟,已经包括血样转移,试剂准备的时间。

速度完全可以与任何一个全自动的核酸提取平台相比,甚至更好。

 

提取的结果:

采用同一批抗凝血200ul,提取出来的96个DNA

样品进行凝胶电泳,观察其完整性。


OD 260/280结果:

纯度高,一致性很好

凝胶电泳结果:

分子完整,一致性很好

 

1593587855618036.jpg

 

 


关于Medusa96高通量移液器:

 

Medusa96是一款96通道1000ul大体积的电子移液器,具有XYZ三维移动的平台支架,方便操作者准确可靠地进行移动,定位。

移液范围从10~1000ul,足够满足核酸提取的需求。

具备吸喷混合的功能,方便进行加样前的磁珠混匀,以及提高裂解、洗涤、洗脱的效果。

具有4.3寸大屏幕高分辨率触摸屏,方便用户进行一吸一喷,一吸多喷等动作编排。

 

移液精度:

100ul CV < 0.8%,准确度±1ul(使用200ul tips)

1000ul CV < 0.5%,准确度±10ul(使用1000ul tips)

 

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