转甲状腺素蛋白淀粉样变性CRISPR疗法有望进入临床
开发CRISPR/Cas9基因编辑疗法的生物医药公司Intellia Therapeutics宣布，一项临床前研究结果于近日发表在《Cell Reports》期刊上。?在这项临床前试验中取得的出色结果，也有望助力CRISPR/Cas9技术进入人体临床试验。
研究显示，脂质纳米粒子递送Cas9 mRNA和sgRNA导致小鼠肝脏中运甲状腺素蛋白水平降低97％，并且至少维持12个月。（图片来源：《Cell Reports》）
转甲状腺素蛋白淀粉样变性（ATTR）是由TTR基因中约136个不同遗传突变之一引起的慢性进行性和衰弱性疾病。由这些基因突变引起的异常蛋白质沉积可影响外周和自主神经系统，导致患者在20岁左右时发生各种症状。
Intellia的体内定点项目使用脂质纳米粒子（LNPs）将CRISPR/Cas9组合递送到肝脏。该公司在体内靶向ATTR的研究项目与Regeneron Pharmaceuticals共同开发。Intellia旨在实现对肝细胞内的突变TTR基因特定DNA实施敲除编辑。这些基因可导致心脏，神经和其他组织中破坏性运甲状腺素蛋白沉积。
这项临床前编辑研究旨在探索使用LNP将CRISPR/Cas9部分递送至小鼠肝脏，介导肝细胞内标靶DNA的编辑。研究中将LNP，Cas9 mRNA与靶向小鼠TTR基因的化学合成gRNA的共同配方，通过一次尾静脉注射到小鼠体内。其他研究评估了在引导模式下不同因素对编辑的影响，化学修饰程度和有剂量反应关系的编辑效率。通过四个月的时间，研究评估了肝脏内编辑的耐久性，并测量了Cas9 mRNA和sgRNA的药代动力学（PK）参数。
研究显示，脂质纳米粒子递送Cas9 mRNA和sgRNA导致小鼠肝脏中运甲状腺素蛋白水平降低97％，并且至少维持12个月。该论文还报道了使用Intellia的LNP递送系统后，三天内在小鼠体内检测不到CRISPR/Cas9部分。研究人员进一步表明，Intellia的LNP技术对更高级啮齿动物，如大鼠也具有类似的稳定和有效的递送结果。
“这些数据表明，我们专有的脂质纳米粒子技术通过单剂量实现了对TTR基因显著和持久的编辑，”Intellia平台和输送技术高级副总裁David Morrissey博士说：“我们的脂质纳米粒子系统是一种短暂表达系统，可使CRISPR/Cas9能够编辑目标基因，然后从细胞中清除。 这样可以最大限度的减少细胞中CRISPR/Cas9的停留时间，并且减少与CRISPR/Cas9相关的安全问题。如果需要，LNP还允许我们重新给药，以达到预期的治疗效果。本文详细介绍了迄今为止最有效的全身性CRISPR/Cas9递送方法，这将进一步支持我们今年提出的IND项目和未来的肝脏遗传疾病治疗。”
我们期待这项技术能够顺利进入临床，早日为我们带来新型基因编辑疗法。
