高速逆流色谱分离纯化EGCG3_Me的研究
摘要: 首次采用高速逆流色谱法对经自制聚酰胺初步分离的表没食子儿茶素-3-( 3″-O-甲基) 没食子酸酯( EGCG3″Me) 样品中的EGCG3″Me 单体进行分离纯化。结果表明，选择水－ 甲醇－ 乙酸乙酯－ 正己烷( 体积比5 ∶ 2 ∶ 9 ∶ 1) 为高速逆流色谱分离的两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，在主机转速700 r /min、流速2. 0 mL/min、检测波长254 nm 的条件下，可对EGCG3″Me 实现良好分离。经高效液相色谱检测，分离纯化后的EGCG3″Me 纯度可达90%以上，产物的收率为76. 53%。
表没食子儿茶素-3-( 3″-O-甲基) 没食子酸酯( EGCG3″Me) 是茶叶中一类甲基化的儿茶素化合物。研究表明，EGCG3″Me 比表没食子儿茶素没食子酸酯( EGCG) 、表儿茶素没食子酸酯( ECG) 、表没食子儿茶素( EGC) 具有更强的抗过敏和消炎等药理作用［1 － 2］，在医学、保健食品开发等领域具有广阔的应用前景［3 － 4］。目前，EGCG3″Me 分离纯化技术研究主要集中于日本，出于知识产权、成果保护等原因，国外未见相关报道。国内已有少量关于茶叶中EGCG3″Me 的研究［5 － 6］，但其分离纯化研究较少［7 － 9］，且均基于高效液相色谱( HPLC) 技术。
高速逆流色谱( High speed countercurrent chromatography，HSCCC) 是20 世纪80 年代初发展起来的一种色谱分离纯化技术。作为一种液－ 液分配色谱技术，HSCCC 无需固体支撑，克服了固相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形拖尾等缺点，可在短时间内实现高效分离［10］。目前，该技术已广泛应用于天然植物有效成分等的分离纯化［11 － 14］。本文通过对HSCCC 的溶剂体系、保留体积、保留时间等工艺条件进行优化，实现了EGCG3″Me 单体的分离纯化，可为EGCG3″Me 资源的进一步开发和利用提供参考。
