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植物组织渗透势测定-质壁分离法

2019.4.18

实验概要

本实验介绍了植物组织渗透势(osmotic potential)测定-质壁分离法的原理及操作步骤等。

实验原理

将植物组织置于对其无毒害的一系列不同浓度的溶液里处理一定时间,然后镜检发生质壁分离的细胞数,通常视野中有50%的细胞发生质壁分离时定为初始质壁分离,细胞初始质壁分离时压力势为零,因而可把引起细胞初始质壁分离的外界溶液称之为等渗溶液,其溶液具有的渗透势即为细胞的渗透势。由于很难正好找到引起50%细胞发生质壁分离的浓度。因此通常用插值法求得等渗溶液浓度,代入公式即可计算渗透势。

主要试剂

蔗糖

主要设备

1. 显微镜

2. 载玻片

3. 盖玻片

4. 镊子

5. 刀片

6. 培养皿(或具塞试管)

7. 记号笔

8. 滴管

实验步骤

1. 配制0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mol蔗糖/L水的质量摩尔浓度,贮6个试剂瓶中,必要时配制溶液浓度的相差可≤0.05mol蔗糖/L水。
2. 取6套干净清洁的小培养皿,用记号笔编号,将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层,盖好皿盖。
3. 将带有色素的植物组织或叶片(可选用有色素的洋葱鳞片的外表皮,紫鸭跖草,蚕豆,小麦,玉米等叶的表皮)撕取表皮迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,每个培养皿中放材料3个左右,使其完全浸没,浸泡20-40分钟。
4. 到时后,取出表皮,放在载玻片上,滴一滴相同浓度的蔗糖,盖上盖玻片,在显微镜下观察质壁分离的细胞数和细胞总数,直接或间接(插值法)地找出引起50%细胞发生质壁分离的外界溶液浓度,即为细胞渗透浓度值。
插值法求细胞渗透浓度的公式为:
式中Og为细胞的渗透浓度,mg1为引起p1质壁分离的浓度m2为引起P2质壁分离的浓度,P1为由m1溶液引起质壁分离百分数,p2为由m2溶液引起质壁分离的百分数。
求得Og按下式计算渗透势
ψπ =-iRTOg
ψπ为细胞渗透势(bar);R为气体常数(0.083bar L/mol·K);T为绝对温度(273 t℃);i等渗系数,蔗糖为1。


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