高效液相色谱仪检测11种三嗪类农药
一、方法原理
用丙酮-二氯甲烷作为萃取剂，通过索氏提取或加压流体萃取从土壤或沉积物中提取三氮碱农药该提取物经固相萃取纯化，浓缩，经定容液相色谱仪分离，经紫外检测器检测，保留时间定性和外部标准定量。
二、试剂和材料
除另有规定外，应使用符合国家标准的分析试剂进行分析。实验用水为新制备的超纯水或蒸馏水..
丙酮（C 3 H 6 O）：农残级。
二氯甲烷（CH2Cl2）：农业剩余物等级。
己烷（c6h14）：农业残渣级。
乙腈（C2H3N）：液相色谱法。
丙酮-二氯甲烷混合溶剂：1+1。以1：1的体积比与丙酮和二氯甲烷混合。
丙酮-正己烷混合溶剂：1+9。以1∶9的体积比与丙酮和正己烷混合。
三嗪类农药标准贮备液：ρ=1000mg/L。
商用认证的标准溶液可直接购买，并应按照标准溶液证书的要求储存，并应恢复到室温，摇匀良好。
三嗪类农药标准溶液：ρ=10.0~100mg/L。
用乙腈稀释标准储备液，配制浓度为10.0~100 mg/L的标准使用溶液，避光至4°C以下，冷藏60d。
无水硫酸钠（Na 2SO 4）。
在450℃下在马弗炉中烘烤4小时，冷却，密封在玻璃瓶中，并储存在干燥器中。
硅藻土：粒径150-250μm（100-60目）。
在450℃下在马弗炉中烘烤4小时，冷却，密封在玻璃瓶中，并储存在干燥器中。
石英砂：粒度150-250μm（100-60目）。
在450℃下在马弗炉中烘烤4小时，冷却，密封在玻璃瓶中，并储存在干燥器中。
固相萃取柱。
市售硅酸镁、硅胶、氨基或其他等效固相萃取柱1000 mg/6 ml或更大。
玻璃纤维或玻璃纤维过滤器。
使用前用丙酮-二氯甲烷混合溶剂清洗，待溶剂挥发干燥后，放入磨口玻璃瓶中密封。
索氏提取套管：玻璃纤维或天然纤维材料套管。
玻璃纤维套管使用前在马弗炉中450℃烘烤4小时，冷却后放入磨碎的玻璃瓶中密封保存；天然纤维套管使用前浸泡在丙酮-二氯甲烷混合溶剂中，溶剂挥发干燥后，放入磨碎的玻璃瓶中密封保存。
氮气：纯度≥99.99％。
三、仪器和设备
高效液相色谱仪：具有梯度洗脱功能，柱温箱温度可控，并提供紫外检测器或二极管阵列检测器。
色谱柱：填料为十八烷基硅烷键合硅胶粒径5μm柱长250 mm，内径4.6 mm或其它等效色谱柱。
该萃取装置包括索氏萃取装置或加压流体萃取仪器。
浓缩装置：旋转式蒸发器、氮气鼓风机或其它性能相当的浓缩设备。
固相萃取装置。
冷冻干燥仪。
棕色玻璃瓶：250 ml。
一般实验室通常使用仪器和设备。
四、样品
样品采集和保存
土壤样品的采集和保存应符合HJ/T 166的有关规定；沉积物样品的采集和保存应符合GB 17378.3、GB 17378.5、HJ 494、HJ 495和HJ/T 91的有关规定。
样品应储存在干净的棕色玻璃瓶中，并在运输过程中避光、密封和冷藏。如果不能临时分析，土壤样品应在4℃下冷藏5天（包括西玛金、西草金、阿特拉津、中丁通、福分津、曲草金15天）沉积物样品应冷冻、密封并避光8天。将样品提取物(7.4.1)冷藏、密封，在4℃避光保存，保存时间为60d。
样品的制备
将试样放入不锈钢板或聚四氟乙烯板中，清除木棍、树叶、石块等杂物，搅拌均匀，按HJ/T 166的要求进行分样。冷冻干燥或干燥剂可用于脱水。
冻干方法：取样品适量，放入冷冻干燥仪干燥脱水干燥后的样品应研磨并均匀混合。重量10克(准确到0.01克)样品进行提取
干燥剂法：称取新鲜样品10g（精确至0.01g）索氏提取法中加入适量无水硫酸钠，加压流体提取法中加入适量硅藻土，研磨成流沙状，全部移入提取装置提取。
水分的测定
称重样品时，称量一个样品，并测量样品的含水量。土壤干物质含量按hj613的要求测定，泥沙含水量按GB 17378.5的要求测定。
试样的制备
提取
以丙酮-二氯甲烷混合溶剂为萃取剂，采用索氏提取法或加压流体萃取法。
索氏提取法：将所有样品小心移入索氏提取套中，置索氏提取器回流管中，在底瓶中加入200毫升丙酮-二氯甲烷混合溶剂回流提取24小时，控制回流速度为3-4次/h，收集提取液。
压力液提取：按照HJ783加载样品，静态提取3次后采集提取液..萃取参考条件：载气压力0.8mpa，加热温度100℃，萃取压力1.034×107pa（1500psi），预热平衡5min，静态萃取5min，溶剂浸出池容积的60%，氮气吹扫60s。
注：如果验证，也可以使用其他等效的提取方法。
过滤和脱水
在玻璃漏斗中放入一层玻璃棉或玻璃纤维滤膜，加入适量无水硫酸钠，将提取物滤入浓缩容器。用2～3ml丙酮二氯甲烷混合溶剂洗涤萃取容器，将漏斗洗涤并收集到浓缩容器中。
浓缩
将提取物浓缩至约0.5ml，加入约5ml正己烷，浓缩至约1ml，将溶剂完全转化为正己烷进行纯化。
净化
固相萃取塔固定在固相萃取装置上用5ml丙酮和10ml正己烷激活萃取柱，以保持柱头湿润。在溶剂流干燥前将浓缩的1ml萃取液转移到色谱柱上，收集出水。浓度容器用3ml正己烷洗涤3次所有洗脱液进入柱内，用10 ml丙酮-正己烷混合溶剂洗脱，并收集所有洗脱液。
浓缩定容
将纯化洗脱液浓缩至约0.5ml，加入约3ml乙腈，浓缩至约0.5ml，将溶剂完全转化为乙腈，用乙腈定容至1.0ml，用高效液相色谱仪测定。
