红细胞渗透脆性（孵育）实验
实验原理
红细胞在低渗盐溶液中，当水渗透其内部达一定程度时，红细胞发生膨胀、破裂。观察红细胞在不同浓度盐溶液中的溶血程度，可以判断其对低渗盐溶液的抵抗力，这种抵抗能力与红细胞表面积与容积的比值有关，比值小者，红细胞抵抗力较小，脆性增加。反之抵抗力增大。
实验方法
材料：
1.171.1mmol/LNaCl溶液、蒸馏水
2.移液管、试管、水浴箱等
方法：
1.取12支试管,分别按下表加入NaCl溶液和蒸馏水，得不同浓度的NaCl溶液。
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试管号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
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171.1 M NaCl溶液（ml） |
0.30 |
0.35 |
0.40 |
0.45 |
0.50 |
0.55 |
0.60 |
0.65 |
0.70 |
0.75 |
0.80 |
0.85 |
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蒸馏水(ml) |
0.95 |
0.90 |
0.85 |
0.80 |
0.75 |
0.70 |
0.65 |
0.60 |
0.55 |
0.50 |
0.45 |
0.40 |
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NaCl最终浓度（mmol/L） |
41.0
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47.9
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54.7
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61.6
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68.4
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75.2
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82.1
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88.9
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95.8
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102.6
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109.4
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116.3
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(g/L) |
2.4 |
2.8 |
3.2 |
3.6 |
4.0 |
4.4 |
4.8 |
5.2 |
5.6 |
6.0 |
6.4 |
6.8 |
2.每管中加入1滴全血（或者肝素抗凝血），轻轻摇匀,在室温静置2h后观察结果。
3.孵育脆性实验，先将肝素抗凝全血37℃孵育24h后，再做1.2步检测。
实验结果计算
先从高浓度开始观察,上层溶液出现透明红色者为开始溶血管,管底红细胞完全消失者为完全溶血管。
参考范围：
开始溶血75.2mmol/L-82.1mmol/L（4.4-4.8g/L）NaCl溶液
完全溶血47.5mmol/L-54.7mmol/L（2.8-3.2g/L）NaCl溶液
孵育后
开始溶血82.1mmol/L-88.9mmol/L（4.8-5.2g/L）NaCl溶液
完全溶血54.7mmol/L-61.6mmol/L（3.2-3.6g/L）NaCl溶液
注意事项
1．氯化钠必须干燥后准确称量，用前新配。
2.每次试验应做正常对照，其结果应在正常范围内，被检者与正常对照开始溶血管NaCl溶液浓度相差0.4g/L有诊断价值。
3.所有器具要干燥，血标本应直接滴入液体内，混匀时不能用力过大，以避免体外溶血。
4.在白色背景下观察结果，判断完全溶血试管时，可低速离心1min后观察。
5.重度贫血患者红细胞太少，黄疸患者开始溶血管不易观察，均可取肝素抗凝血以生理盐水洗涤后，再用生理盐水配成50%的红细胞悬液进行检测。
6．血液标本应避免用枸橼酸盐、草酸盐和EDTA盐抗凝血，以防增加离子强度。如用以上抗凝血标本应用洗涤红细胞进行检测。
