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临床化学检查方法介绍--血清乳酸脱氢酶介绍

2022.3.07

血清乳酸脱氢酶介绍:

  乳酸脱氢酶(LDH或LD)是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一,可催化丙酮酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应,也可催化相关的α-酮酸。LDH广泛存在于人体组织中,以心、肾、骨骼肌含量最高,肝、脾、胰和肺组织次之。LDH测定方法主要有比色法和连续监测法。

血清乳酸脱氢酶正常值:

  (1)、比色法:150-450U/L。
  (2)、连续监测法:男80-280U/L
  女100-230U/L

血清乳酸脱氢酶临床意义:

  LDH测定常用诊断心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤。
  (1)心肌梗死:发病10-12h升高,24-48h达高峰,8-9天后恢复正常。与CK相比,虽然酶活性出现较迟,阳性率较低,但持续时间长,且活性增高的程度与心肌梗死的病情密切相关,梗死范围越大,其酶活性越高。若LDH增高后恢复迟缓,或在病程中再次增高,提示梗死范围扩大,预后不良。
  (2)肝脏疾病:急性肝炎或慢性活动性肝炎LDH常显著或中度升高。其敏感度略低于ALT。肝癌时LDH活性明显升高,尤其是转移性肝癌增高更显著。可达1000U/L。
  (3)血液病:白血病、巨幼红细胞贫血、恶性淋巴瘤等LDH活性升高。
  (4)其他:营养不良、横纹肌损伤、胰腺炎、肺梗塞等LDH活性也升高。

血清乳酸脱氢酶注意事项:

  (1)、比色法:
  ①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物,但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应。而乳酸锂为固体,稳定,易于称量。
  ②除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率。
  ③比色应在5-15min内完成,否则吸光度降低。
  ④结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数。
  (2)、连续监测法:
  ①标本勿溶血,当溶血达Hb 0.8g/L时,LDH活性可升高58%。
  ②标本于室温(25℃)保存,2天内酶活性稳定,冰箱保存酶活性降低,-20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活。
  ③用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意,草酸盐可抑制LDH活性。
  ④复溶后溶液变浊或初始吸光度>0.5应弃去。
  ⑤利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性,但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同,其参考区间也有差异。以乳酸和NAD为底物,在340nm监测吸光度增高速率为正向反应,以LD-L表示;以丙酮酸和NADH为底物,监测340nm吸光度下降速率为逆向反应,以LD-P表示。正逆反应两法相比,LD-L法的主要优点是:A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大,前者冰箱可保存6个月以上,而后者仅几天;B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽;C.重复性比LD-P好。由于逆向反应速度比正向反应速度快,其参考值约为LD-L的2倍。

血清乳酸脱氢酶检查过程:

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